Atividade Experimental 1 - Como extrair e vizualizar moléculas de DNA?
Material:
-Almofariz;
-Funil;
-Papel de filtro;
-Algodão hidrófilo;
-2 tubos de ensaio;
-Pipeta;
-Vareta;
-Colher;
-Gobelé;
Reagentes:
-Cebola;
-10ml de detergente de loiça;
-Sal;
-Álcool refrigerado;
-70ml de água destilada;
-Ácido clorídrico (à temperatura ambiente);
-Reagente de Schiff (fucsina descorada);
Procedimento experimental:
1- Descasque e corte a cebola em pequenos fragmentos e coloque-os no almofariz;
2- Deite o sal e 10ml de detergente da loiça num gobelé com 70ml de água destilada;
3- Agite suavemente a mistura;
4- Coloque a mistura no almofariz e triture-a até o sal ficar dissolvido;
5- Filtre, sucessivamente, o produto obtido através de papel de filtro e de algodão hidrófilo;
6- Faça escorrer, lentamente, álcool refrigerado em quantidade aproximadamente igual à do filtrado ao longo da parede da proveta. Espere algum tempo e procure observar a formação de duas fases: uma superior, alcoólica, e outra inferior, aquosa;
7- O DNA, insolúvel no álcool, precipita e forma uma massa filamentosa, esbranquiçada, que contém proteínas e outros materiais. Com o auxílio de uma vareta, e com movimentos circulares, pode recolher algum material.
8- Para a coloração, pode utilizar a técnica de Feuguen (adaptada a este material);
-coloque o precipitado em água destilada (10 segundos);
-mergulhe-o em ácido clorídrico normal (15 segundos);
-passe novamente o material em água destilada (10 segundos);
-mergulhe o percipitado no reagente de Schiff (3 minutos);